春-软骨组织切片
夏-骨头组织切片
春暖花开、桃红柳绿、叠翠流金、冰魂雪魄,缤纷的四季,就这样展现在我们眼前。这些组织和细胞的形、色、光,宛如生命的画笔,在显微镜下绽放着它们的精彩。科学与艺术的邂逅,让我们不得不感叹生命的纯粹和神奇。
好的组织切片,对后续的染色、检测至关重要。今天,小拓就教大家如何进行组织石蜡切片。
动物处死后,立即从动物体取下所需器官,防止组织细胞自溶变性。用生理盐水将血水清洗后,将组织立即浸入4%多聚甲醛中固定,固定时间>24h。目的是使组织蛋白迅速凝固,使细胞内的结构和成分不再发生变化,保持组织细胞与活体相似的形态结构,固定后的组织块变硬,便于进一步处理。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
固定后组织块内含有大量的水分要彻底脱去,以便石蜡浸入。将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-65°融化石蜡I 1h-65°融化石蜡II 1h-65°融化石蜡III 1h。
将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入模具框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20℃冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从模具框中取出并修整蜡块。
将修整好的蜡块置于石蜡切片机切片,厚5~8μm,连续操作可形成蜡带。用镊子和毛笔轻轻取下,放于摊片机45℃ 温水上,使褶皱自然舒展开。载玻片将组织捞起。使其贴片,放置于烤片机(约60℃)烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
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